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Taq DNA 聚合酶使用说明

来源: 作者:雷根生物 人气: 发布时间:2010-02-02
摘要:lTaq DNA 聚合酶属于耐热性聚合酶,分子量94KD,催化5-3DNA合成,DNA聚合时的延伸速度是所有嗜热DNA聚合酶中最快的。其最佳反应温度70-75℃,dNTPs的工作浓度为100-300M,最佳Mg 2+ 浓度为2-3mM,最佳PH为8.1-9.1,其PCR产物含3端单个dA,能进行T-A克

l Taq DNA 聚合酶属于耐热性聚合酶,分子量94KD,催化5’-3’DNA合成,DNA聚合时的延伸速度是所有嗜热DNA聚合酶中最快的。其最佳反应温度70-75℃,dNTPs的工作浓度为100-300μM,最佳Mg2+浓度为2-3mM,最佳PH为8.1-9.1,其PCR产物含3’端单个dA,能进行T-A克隆。DNA扩增时,20μl反应体系需1-1.5U,50μl反应体系需2-3U。

l 经实验证实,本公司Taq DNA 聚合酶能很好地扩增2.1Kb人基因组DNA片段和6kb Lambda基因组DNA片段。超过此扩增长度的结果不能保证。
l 包装及组成:

总体积                       500 U

Taq DNA 聚合酶(5U/μl)      100μl
10×Taq Bffer                 1000μl
 

 l 本公司Taq DNA 聚合酶储存于50mM Tris-Hcl(PH8.0);100mM NaCl;0.1mM EDTA;0.5mM DTT;1%TritonX-100;50%Glycerol缓冲液中。-20℃保存一年以上,避免反复冻融。

l 10×Taq Buffer成份如下:500mM KCl;100mM Tris-Hcl(PH9.0); 1%TritonX-100;20mM MgCl2

使用方法如下

 
 
内容
20μl反应体系
50μl反应体系
DNA模板
5-50ng
10-100ng
上游引物
10-20 pmol
20-50 pmol
下游引物
10-20 pmol
20-50 pmol
10×Taq Buffer
2μl
5μl
dNTPs(10mM)
0.5μl
1μl
Taq DNA 聚合酶
1-1.5 U
3-5 U

补超纯水或清毒双蒸水至20μl或50μl,充分混匀后短暂离心,若基因扩增仪不防蒸发,加入1-2滴石腊油。

 
 

北京雷根生物技术有限公司

2010.02.02

作者:雷根生物

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