欢迎来访Www.Ggene.Cn,基因时代为生命科学提供源动力!

网站地图帮助中心

二级
导航

做RT-PCR内参的作用是什么?

来源:未知 作者:编辑 人气: 发布时间:2016-09-30
摘要:我现在在做RT-PCR,请问大家内参的作用是什么??是不是我的每个标本都要做内参??内参可以加在样本的试管里一起P吗??我用的是TaKaRa的两步法试剂盒(Ver.3.0)。 只知道引物的序列能用什么方法知道P出来的目的条带长度??? 答:内参是看家基因,一般用bate-actin

我现在在做RT-PCR,请问大家内参的作用是什么??是不是我的每个标本都要做内参??内参可以加在样本的试管里一起P吗??我用的是TaKaRa 的两步法试剂盒(Ver.3.0)。

只知道引物的序列能用什么方法知道P出来的目的条带长度???

答:内参是看家基因,一般用bate-actin,有时也用GAPDH。

内参的选择:普通PCR内参的大小没有多大要求,但real time一般选择300bp以下

它的作用在于你提取的RNA逆转录成cDNA时,加入的浓度可能会不一致,即使用分光广度计测其浓度,也会有仪器误差.PCR时,每个标本都要做对应的内参,而且每次都要做,跑出的条带进行灰度分析,用目的基因的积分光密度比上内参的光密度就是你这个基因实际表达的量.

作者:编辑

Copyright 2008-2015 Powered By Ggene.Cn.
鄂ICP备15005758号-1

声明:本网站尊重并保护知识产权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果我们转载或引用的作品侵犯了您的权利,请通知我们,我们会及时删除!