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HEK-293细胞 293A 293S 293T 和293FT cell区别比较

来源:生物病毒网 作者:无城 人气: 发布时间:2010-01-10
摘要:293细胞分为几种,文献上所提总是笼统的讲293细胞,可293有293A,还有293T,请问二者有什么区别,是否293A是用来包腺病毒的,293T是用来包慢病毒的,是否还有其他293细胞,比如293S 课题需要做腺病毒转染,看了initrogen的说明书上说用293A细胞。在clontech的
293细胞分为几种,文献上所提总是笼统的讲293细胞,可293有293A,还有293T,请问二者有什么区别,是否293A是用来包腺病毒的,293T是用来包慢病毒的,是否还有其他293细胞,比如293S

 
课题需要做腺病毒转染,看了initrogen的说明书上说用293A细胞。在clontech的说明书上就是293细胞。

 
293细胞比较容易转染,是一个很常用的表达研究外源基因的细胞株。293细胞的一个衍生株:293T/17的转染效率更高,成为广大研究者研究基因功能的一个强大工具。 

 
  293细胞的缺陷是生长过程中贴壁强度比较小。所以在实验过程中容易流失,从而影响实验结果。如果一个实验室新得到的293细胞是邮寄得到的并且细胞在培养瓶中,就需要让细胞沉降几天时间,因为大量细胞会漂浮在培养液里。

 
来源:人体肾脏 形态:上皮细胞 生长特性:贴壁 注释:该细胞含腺病毒5 DNA 。

 
培养液: MEM( 含 2 mM L-谷氨酰胺 和 Earle's BSS,1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸, 1.0 mM 丙酮酸钠), 10% 马血清(热灭活)。

 
传代: 吸去培养液。 用0.25% (w/) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次,以去除血清(血清会抑制胰酶的活性)。 加2-3毫升Trypsin-EDTA,放在37℃培养箱内约5分钟,直到细胞全部脱落。 加6-8毫升培养液,用移液器把细胞吹散。 加适量的细胞到新的培养器皿中。(以1:2到1:4为宜,传代期间培养液2-3天更换1次) 

 
冻存:95%培养液+5%DMSO冻存于液氮。 

 
293A比较有意思了,是293中后来又建的细胞亚株,这个A是adhere的意思,就是说293倾向于形成单层细胞(monolayer),它比293好的地方是在做计算病毒数量的空斑试验(plaque assay)293A是均匀的一层,没有细胞重叠和细胞空隙(hole),就这个意思,这个A所对的是293S(suspension).

 
293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad 5) DNA的永生化细胞,表达转染的腺病毒5的基因。
293T细胞表达 E1A蛋白,S40大T抗原,含有S40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。
293FT细胞能制造高滴度的慢病毒。293A细胞来源于人肾纤维母细胞,组成性表达 E1A 和 E1B 蛋白。

 

作者:无城

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